厭氧培養(yǎng)箱的操作注意事項

厭氧培養(yǎng)箱是用于培養(yǎng)厭氧微生物的關(guān)鍵設(shè)備，操作時需嚴(yán)格遵守以下注意事項以確保實驗安全和培養(yǎng)效果：
一、操作前準(zhǔn)備
1. 檢查氣源
  確認(rèn)氮氣、氫氣、二氧化碳氣瓶壓力充足（通常需≥0.3MPa），氣體純度≥99.99%，避免雜質(zhì)影響厭氧環(huán)境。
  檢查氣體管道連接是否密封，無泄漏（可用肥皂水檢測）。
2. 預(yù)還原培養(yǎng)基
  培養(yǎng)基使用前需煮沸驅(qū)氧，并迅速放入厭氧箱內(nèi)預(yù)還原24小時以上（如使用刃天青指示劑，確保無色狀態(tài)）。
3. 設(shè)備預(yù)運行
  提前開啟厭氧箱電源，運行至少2小時（或按說明書要求），確保箱內(nèi)達(dá)到厭氧狀態(tài)（氧濃度＜1ppm，可用氧指示劑驗證）。

二、操作過程注意事項
1. 樣品傳遞規(guī)范
  使用專用傳遞艙（過渡艙）：
  先抽真空（至 0.1MPa），再充氮氣（重復(fù)2 3次），確保氧氣被置換。
  避免頻繁開啟傳遞艙，每次操作后需恢復(fù)厭氧環(huán)境。
2. 個人防護(hù)
  佩戴無粉手套（避免粉末污染箱內(nèi)環(huán)境），必要時使用口罩和護(hù)目鏡。
  操作氣體（如氫氣）時嚴(yán)禁明火或靜電。
3. 箱內(nèi)操作要點
  工具和物品需用酒精消毒并晾干后放入，避免帶入氧氣或水分。
  動作輕緩，減少氣流擾動，避免手套破損（定期檢查手套密封性）。
  培養(yǎng)皿、試管等容器需密封（如使用厭氧袋或膠塞）。

三、使用后維護(hù)
1. 清潔與消毒
  定期用75%酒精或專用消毒劑擦拭箱體內(nèi)壁、手套和托盤，防止微生物污染。
  廢液、廢培養(yǎng)基需及時移出，避免滋生雜菌。
2. 氣體管理
  關(guān)閉氣瓶閥門后，需釋放管道殘余壓力（防止逆流）。
  長期不用時，每周至少開機(jī)運行1次以維持厭氧環(huán)境。
3. 催化劑再生
  鈀催化劑（除氧劑）每2 3個月于160℃烘烤2小時再生，失效后及時更換。

四、安全警示
1. 氫氣風(fēng)險
  氫氣易r易爆，確保箱體接地良好，操作時遠(yuǎn)離火花、高溫設(shè)備。
2. 缺氧風(fēng)險
  避免將頭部伸入箱內(nèi)，防止窒息（箱內(nèi)為無氧環(huán)境）。
3. 應(yīng)急處理
  如遇漏氣或著火，立即關(guān)閉氣源，使用二氧化碳滅火器（不可用水或干粉）。

五、常見問題處理
  箱內(nèi)濕度高：添加硅膠干燥劑或開啟除濕功能。
  氧濃度升高：檢查手套密封性、傳遞艙操作步驟是否規(guī)范，或更換催化劑。
  培養(yǎng)污染：排查傳遞艙消毒程序、培養(yǎng)基滅菌是否c底。